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一氧化氮(NO)與一氧化氮合成酶(NOS)的檢測(cè)


一氧化氮(NO)




一氧化氮(NO)是一種極不穩(wěn)定的生物自由基,分子小,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,常溫下為氣體,微溶于水,具有脂溶性,可快速透過生物膜擴(kuò)散,是生物體內(nèi)重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子,廣泛分布于生物體內(nèi)各組織中,特別是神經(jīng)組織。在機(jī)體免疫、循環(huán)、呼吸、消化、泌尿、生殖等系統(tǒng)中也起著十分重要的作用。


一氧化氮合成酶(NOS)及其分型




一氧化氮合成酶(NOS)是生物體內(nèi)催化L-精氨酸合成NO的一類酶,主要存在于血管平滑肌、巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、肝細(xì)胞、腎小球膜細(xì)胞等各種細(xì)胞中。動(dòng)物體內(nèi)NOS有3種亞型,分別為神經(jīng)元型NOS(nNOS)、內(nèi)皮型NOS(eNOS)、損傷誘導(dǎo)型NOS(iNOS)。這三種亞型在不同的細(xì)胞和組織中有不同的表達(dá)模式和功能。

nNOS主要存在于神經(jīng)系統(tǒng)中,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)表達(dá)的nNOS與生物的學(xué)習(xí)、記憶等密切相關(guān),外周神經(jīng)系統(tǒng)(PNS)中nNOS產(chǎn)生的NO作為神經(jīng)遞質(zhì)有著調(diào)節(jié)腸道蠕動(dòng)、舒張血管的作用。eNOS主要存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞、腎小管內(nèi)皮細(xì)胞等,血管內(nèi)皮細(xì)胞eNOS產(chǎn)生的NO可抑制血小板聚集和黏附于血管壁,防止出現(xiàn)血栓,還可通過調(diào)控動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)基因的表達(dá),阻止白細(xì)胞向血管壁的遷移和黏附,減少血管炎癥,從而預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化。iNOS主要存在于與炎癥反應(yīng)相關(guān)的巨噬細(xì)胞、白細(xì)胞中,通常在細(xì)胞中不表達(dá),但可被細(xì)菌脂多糖、細(xì)胞因子和其他誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)表達(dá),產(chǎn)生大量NO,引起DNA損傷和線粒體呼吸抑制等。


一氧化氮(NO)含量的檢測(cè)




NO在生物體內(nèi)或水溶液中極易氧化生成NO2-和NO3-,可通過檢測(cè)NO2-和NO3-的含量間接得到NO含量。常見的檢測(cè)方法有化學(xué)法與酶法

化學(xué)法是在酸性條件下,NO2-與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物,進(jìn)一步與萘基乙烯基二胺偶合,產(chǎn)物在550nm處有特征吸收峰,計(jì)算可得樣本NO含量。該法操作簡(jiǎn)便,用時(shí)較短,方便進(jìn)行大批量樣本檢測(cè)。

酶法測(cè)定總NO含量是利用硝酸還原酶特異性將NO3-還原成NO2-,再與重氮鹽磺酸胺、萘基乙烯基二胺反應(yīng)生成有色產(chǎn)物進(jìn)行計(jì)算。該法檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性更高,NO含量較低的樣本可用此法檢測(cè)。


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產(chǎn)品貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

BC1470

一氧化氮(NO)含量檢測(cè)試劑盒

(酶法測(cè)定總NO)

BC1475

一氧化氮(NO)含量檢測(cè)試劑盒

(酶法測(cè)定總NO)

BC5480

一氧化氮(NO)含量檢測(cè)試劑盒

(化學(xué)法)

BC5485

一氧化氮(NO)含量檢測(cè)試劑盒

(化學(xué)法)

BC5680

一氧化氮合成酶(NOS)

活性檢測(cè)試劑盒

BC5685

一氧化氮合成酶(NOS)

活性檢測(cè)試劑盒

BC5690

一氧化氮合成酶分型

(TNOS、iNOS、cNOS)

活性檢測(cè)試劑盒

BC5695

一氧化氮合成酶分型

(TNOS、iNOS、cNOS)

活性檢測(cè)試劑盒

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索萊寶生化試劑盒貨號(hào)以“0"、“5"結(jié)尾,分別代表兩類反應(yīng)體系。以“0"結(jié)尾的代表試劑盒所用方法為分光光度法(反應(yīng)體系約1mL),可以用分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè);以“5"結(jié)尾的試劑盒代表所用方法為微量法(反應(yīng)體系約0.2mL),可以用分光光度計(jì)或者酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)。


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