產(chǎn)品名稱:輔酶ⅡNADP(H)含量檢測試劑盒
產(chǎn)品型號:BC1100
產(chǎn)品特點:輔酶ⅡNADP(H)含量檢測試劑盒可見分光光度法 BC1100 50T/24S酸性提取液:50mL×1 瓶,4℃保存;堿性提取液:50mL×1 瓶,4℃保存;試劑一:基質(zhì)緩沖液 15mL×1 瓶,4℃保存;試劑二:粉劑×1 支,-20℃保存,用時加入 4mL 雙蒸水,混勻;試劑三
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輔酶ⅡNADP(H)含量檢測試劑盒
可見分光光度法
注意:正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
BC1100
50T/24S
酸性提取液:50mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:50mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:基質(zhì)緩沖液 15mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 支,-20℃保存,用時加入 4mL 雙蒸水,混勻;
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時加入 4mL 雙蒸水,混勻;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時加入 4mL 雙蒸水,混勻;
試劑五:液體 1.8mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 30mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:液體 50mL×1 瓶,4 ℃保存。
一、NADP 和 NADPH 的提?。?br />1、血清(漿)中 NADP 和 NADPH 的提取:
NADP 的提?。喝?0.1mL 血清(漿),加入 0.9 mL 酸性提取液,煮沸 5min(蓋緊);冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清加入等體積堿性提取液使之中和;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提?。喝?0.1mL 血清(漿),加入 0.9 mL 堿性提取液,煮沸 5min,冰浴中冷卻后,10000g 4℃離心10min,取上清加入等體積酸性提取液使之中和;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
2、組織中 NADP 和 NADPH 的提取:
NADP 的提?。悍Q取約 0.1g 組織,加入 0.9 mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊),冰浴冷卻后,10000g4℃離心 10min,取上清加入等體積堿性提取液混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADPH 的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.9 mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊),冰浴冷卻后,10000g4℃離心 10min,取上清加入等體積酸性提取液混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
3、細胞或細菌中 NADP 和 NADPH 的提?。?br />NADP 的提?。菏占?400-500 萬細胞或細菌,加入 0.9 mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20%或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,冰上保存待測。
NADH 的提?。菏占?400-500 萬細胞或細菌,加入 0.9 mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20%或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,冰上保存待測
相關(guān)文獻:
《Understanding the stress responses of Kluyveromyces marxianus after an arrest during high-temperature ethanol fermentation based on integration of RNA-Seq and metabolite data》 作者:Xiaofen Fu, Pengsong Li,Lei Zhang, Shizhong Li 期刊:Applied Microbiology and Biotechnology 影響因子:3.67 PMID:30673809
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