產(chǎn)品名稱(chēng):Hoechst 33258 熒光染料
產(chǎn)品型號(hào):B8030-25
產(chǎn)品特點(diǎn):Hoechst 33258 熒光染料說(shuō)明:熒光色素;用于DNA、染色體和核酸的染色;熒光染色法和免疫熒光技術(shù)。
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Hoechst 33258 熒光染料
有效期 | 3年 |
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英文名稱(chēng) | Hoechst 33258 |
CAS | 23491-45-4 |
分子式 | C25H24N6O·3HCl |
分子量 | 533.88 |
儲(chǔ)存條件 | −20℃ |
純度 | Purity≥98%(TLC) |
外觀(性狀) | 黃色或綠色粉末 |
單位 | 支 |
別名:2'-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)- 2,5'-bi(1H-benzimidazole) trihydrochloride;2-[2- (4-Hydroxyphenyl)-6-benzimidazoyl]-6-(1-methyl-4- piperazyl)benzimidazole trihydrochloride;HOE 33258; Hoechst 33258
說(shuō)明:熒光色素;用于DNA、染色體和核酸的染色;熒光染色法和免疫熒光技術(shù)。Hoechst 33258 是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,它在嵌入雙鏈 DNA 后釋放強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光,對(duì)細(xì)胞的毒性較低。Hoechst 33258 常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè),也可以用于普通的細(xì)胞核染色,或常規(guī)的DNA染色。
物理性狀:黃色深黃色粉末;溶于水,黃或棕色溶液,參考濃度為9.80 - 10.20 mg/ml;熔點(diǎn)>300℃。
用途:細(xì)胞遺傳學(xué)研究的常用試劑,熒光染色細(xì)胞的DNA ,插入DNA的A-T區(qū),具有低的細(xì)胞毒性,形成膜滲透性熒光DNA鏈。
用于細(xì)胞核染色時(shí),推薦的Hoechst 33258工作濃度為0.5-10μg/ml。
配制母液
Hoechst 33258溶于水,溶解度可達(dá)10mg/ml。因此可配制成10mg/ml的母液于4℃避光保存。
注意事項(xiàng)
1) Hoechst 33258 對(duì)人體有一定刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
2) 熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。
3) 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4) 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 用PBS或合適的緩沖液制備10~50µM Hoechst 33258染色液。
2. 固定的細(xì)胞或組織染色:
對(duì)于固定的細(xì)胞或組織樣品,固定后,適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色,則行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst33258染色。如果不需要進(jìn)行其它染色,則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33258染色。
a) 對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片:加入適量Hoechst 33258染色液,覆蓋住樣品即可。對(duì)于懸浮細(xì)胞:少加入待測(cè)染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3-5分鐘。
b) 吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。
c) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長(zhǎng)350nm,發(fā)射波長(zhǎng)460nm。
3. 活細(xì)胞或組織染色:
a) 細(xì)胞培養(yǎng)物中加入適量Hoechst 33258染色液,約1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積,必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對(duì)于六孔板一個(gè)孔需加入1ml染色液,對(duì)于96孔板一個(gè)孔需加入100μl染色液。
b) 在 37℃培養(yǎng)細(xì)胞 10~20 分鐘。
c) 用 PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次。
d) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長(zhǎng)350nm,發(fā)射波長(zhǎng)460nm。
相關(guān)文獻(xiàn):
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Hoechst 33258 熒光染料
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