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產(chǎn)品名稱:丙酮酸(PA)含量檢測試劑盒

產(chǎn)品型號:BC2200

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:丙酮酸(PA)含量檢測試劑盒
丙酮酸通過乙酰CoA 連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝,起著重要的樞紐作用。
丙酮酸與2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在堿性溶液中呈櫻紅色。

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BC2200丙酮酸(PA)含量檢測試劑盒的詳細資料:

丙酮酸(PA)含量檢測試劑盒

 

丙酮酸(PA)含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法

注意:正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。
貨號:BC2200
規(guī)格:50T/48S

產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體50mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體9mL×1 瓶, 4℃保存;
試劑二:液體50mL×1 瓶, 4℃保存;
丙酮酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液,1mg/mL:液體1mL×1瓶, 4℃保存。

產(chǎn)品說明:
丙酮酸通過乙酰CoA 連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝,起著重要的樞紐作用。
丙酮酸與2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在堿性溶液中呈櫻紅色。

需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。

操作步驟:
一、丙酮酸提取:
1、 細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104 個):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議500 萬細菌或細胞加入1mL 提取液),超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30 次),靜置30min,8000g,常溫離心10min,取上清待測。
2、 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10 的比例(建議稱取約0.1g 組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿,靜置30min,8000g,常溫離心10min,取上清待測。
3、 血清(漿)樣品:按照血清(漿)體積(mL):提取液體積(mL)為1:5~10 的比例(建議取0.1mL血清(漿)加入1mL 提取液),進行冰浴勻漿,靜置30min,8000g,常溫離心10min,取上清待測。
4、 標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備:將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋100、50、25、12.5、6.25、3.125、1.5625、0?g/ml。

二、測定步驟:
1、 分光光度計預(yù)熱30min 以上,調(diào)節(jié)波長520nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 取300μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本+100μL 試劑一于1.5mL EP 管中,混勻,靜置2min,加入500μL 試劑二,混勻,于520nm 波長處測定吸光值A(chǔ)。
三、丙酮酸含量計算:
1、 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度和測定值建立標(biāo)準(zhǔn)曲線;y為丙酮酸鈉含量(μg/mL),x為吸光值。
2、 按照血清(漿)體積計算
丙酮酸含量(μg/mL)= (y×V1)÷(V3×V1÷V2)=y×10
3、 按照蛋白濃度計算
丙酮酸含量(μg/mg prot)=(y×V1)÷(V1×Cpr)=y ÷Cpr
4、 按照樣品質(zhì)量計算
丙酮酸含量(μg/g 鮮重)= (y×V1)÷(W ×V1÷V2)=y÷W
5、 按照細菌或細胞密度計算
丙酮酸含量(μg/104 cell)=(y×V1)÷(500×V1÷V2)= y÷500

V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.3mL;
V2:加入提取液體積,1 mL;
V3:加入血清(漿)體積,0.1 mL;
Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;
W:樣本質(zhì)量,g;
500:細菌或細胞總數(shù),500 萬。

相關(guān)文獻:

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《Understanding the stress responses of Kluyveromyces marxianus after an arrest during high-temperature ethanol fermentation based on integration of RNA-Seq and metabolite data》 作者:Xiaofen Fu, Pengsong Li,Lei Zhang, Shizhong Li 期刊:Applied Microbiology and Biotechnology 影響因子:3.67 PMID:30673809
《Cancer-Associated Fibroblasts Accelerate Malignant Progression of Non-Small Cell Lung Cancer via Connexin 43-Formed Unidirectional Gap Junctional Intercellular Communication》 作者:Luo M,Luo Y, Mao N, Huang G, Teng C,Wang H, Wu J, Liao X, Yang J 期刊:Cellular Physiology and Biochemistry 影響因子: PMID:30453281
 

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