產(chǎn)品名稱(chēng):苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品型號(hào):BC0215
產(chǎn)品特點(diǎn):苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性檢測(cè)試劑盒測(cè)定意義:PAL(EC4. 3 1 5)廣泛存在于各種植物和少數(shù)微生物中,是植物體內(nèi)苯丙烷類(lèi)代謝的關(guān)鍵酶,與一些重要的次生物質(zhì)如木質(zhì)素、異黃酮類(lèi)植保素、黃酮類(lèi)色素等合成密切相關(guān),在植物正常生長(zhǎng)發(fā)育和抵御病菌侵害過(guò)程中起重要作用。
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苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品英文名: Micro Phenylalanine Ammonia-lyase (PAL) Assay Kit
產(chǎn)品貨號(hào):BC0215 產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣 產(chǎn)品商標(biāo):Solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存 參考價(jià)格:1280
庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字:苯丙氨酸解氨酶試劑盒
簡(jiǎn)要介紹:PAL(EC4. 3 1 5)廣泛存在于各種植物和少數(shù)微生物中,是植物體內(nèi)苯丙烷類(lèi)代謝的關(guān)鍵酶,與一些重要的次生物質(zhì)如木質(zhì)素、異黃酮類(lèi)植保素、黃酮類(lèi)色素等合成密切相關(guān),在植物正常生長(zhǎng)發(fā)育和抵御病菌侵害過(guò)程中起重要作用。
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 15mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前每瓶加入 4mL 雙蒸水充分溶解待用,可 4℃保存一周。
試劑三:液體 1mL×1 瓶,4℃保存。
產(chǎn)品說(shuō)明:
PAL(EC4.315)廣泛存在于各種植物和少數(shù)微生物中,是植物體內(nèi)苯丙烷類(lèi)代謝的關(guān)鍵酶和 限速酶,在動(dòng)物體內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)。與一些重要的次生物質(zhì)如木質(zhì)素、類(lèi)黃酮類(lèi)植保素、黃酮類(lèi)色素等 合成密切相關(guān),在植物正常生長(zhǎng)發(fā)育、抗病、抗逆反應(yīng)中起重要作用。 PAL 催化 L-苯丙氨酸裂解為反式肉桂酸和氨,反式肉桂酸在 290nm 處有大吸收值,通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率計(jì)算 PAL 活性。
所需的儀器和用品 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研 缽、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、粗酶液提取 稱(chēng)取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液進(jìn)行冰浴勻漿。10000g4℃離心 10 分鐘,取上清,置冰上待測(cè)。
二、測(cè)定步驟
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng) 290nm,蒸餾水調(diào)零。
2、在 EP 管或 96 孔板中按順序加入下列試劑
試劑名稱(chēng)(μL) | 測(cè)定管 | 對(duì)照管 |
樣本 | 5 | |
試劑一 | 145 | 150 |
試劑二 | 40 | 40 |
混勻,30℃ 準(zhǔn)確反應(yīng) 30min | ||
試劑三 | 10 | 10 |
混勻,靜置 10min 后,290nm 處記錄測(cè)定管吸光值 A1 和對(duì)照管吸光值 A2,△A=A1-A2。 注意:對(duì)照管只要做一管 PAL活性計(jì)算
用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1) 按蛋白濃度計(jì)算 單位的定義:每 mg 組織蛋白在該反應(yīng)體系中每分鐘使 290nm 下吸光值變化 0.1 定義為一個(gè)酶活性 單位。 PAL(U/mgprot)=ΔA×V 樣總÷V 樣÷0.1÷T÷Cpr=66.7×ΔA÷Cpr
(2) 按按樣本鮮重計(jì)算 單位的定義:每 g 組織在該反應(yīng)體系中分鐘使 290nm 下吸光值變化 0.1 定義為一個(gè)酶活性單位。 PAL(U/g 鮮重)=ΔA×V 樣總÷V 樣÷0.1÷T÷W=66.7×ΔA÷W V 樣:加入樣本體積,5µL;V 樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,30min;Cpr:樣本 蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣品質(zhì)量。
用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1) 按蛋白濃度計(jì)算 單位的定義:每 mg 組織蛋白在反應(yīng)體系中每分鐘使 290nm 下吸光值變化 0.05 定義為一個(gè)酶活性單 位。 PAL(U/mgprot)=ΔA×V 樣總÷V 樣÷0.05÷T÷Cpr=133.4×ΔA÷Cpr
(2) 按按樣本鮮重計(jì)算 單位的定義:每 g 組織在反應(yīng)體系中每分鐘使 290nm 下吸光值變化 0.05 定義為一個(gè)酶活性單位。 PAL(U/g 鮮重)=ΔA×V 樣總÷V 樣÷0.05÷T÷W=133.4×ΔA÷W V 樣:加入樣本體積,5µL;V 樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,30min;Cpr:樣本 蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣品質(zhì)量。
相關(guān)文獻(xiàn):
《Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)》 作者:Beibei Li,Yang Ding,Xiuli Tang,Guoyi Wang,Shujuan Wu,Xianxian Li,Xiaofei Huang,Tongtong Qu,Jifeng Chen 期刊:Food and Bioprocess Technology 影響因子:3.032 PMID:
苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性檢測(cè)試劑盒
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