產(chǎn)品名稱:聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒
產(chǎn)品型號(hào):D1250
產(chǎn)品特點(diǎn):聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒貨號(hào):D1250規(guī)格:20T、50T本試劑盒采用可以高效、專一結(jié)合DNA的硅基質(zhì)材料的緩沖液系統(tǒng),從聚丙烯酰胺凝膠上回收DNA片段,同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其它有機(jī)化合物、無(wú)機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。使用本試劑盒回收的DNA可適用于后續(xù)各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測(cè)序、文庫(kù)篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)。
免費(fèi)咨詢:010-50973130
聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒
貨號(hào):D1250
規(guī)格:5T、20T、50T
保存:室溫(15℃-25℃) 干燥保存,復(fù)檢期 12 個(gè)月,2℃-8℃保存時(shí)間更長(zhǎng)。
產(chǎn)品說(shuō)明:
本試劑盒采用可以高效、專一結(jié)合 DNA 的硅基質(zhì)材料的緩沖液系統(tǒng),從聚丙烯酰胺凝膠上回收DNA 片段,同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其它有機(jī)化合物、無(wú)機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。使用本試劑盒回收的DNA 可適用于后續(xù)各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測(cè)序、文庫(kù)篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品包裝:
操作步驟:
*次使用前請(qǐng)先在15ml漂洗液中加入60ml無(wú)水乙醇, 所有離心步驟均可使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。
1.將單一的目的 DNA 條帶從聚丙烯酰胺凝膠中切下 (盡量切除多余部分) , 放入 1.5ml 離心管中, 稱取重量,用研磨杵將膠盡量擠壓碎。加入 2 倍體積的溶液 A 吹打混勻(每 100mg 膠加入 200ul 溶液 A) ,75℃水浴30 分鐘。
2.用 1ml 的去尖吸頭吸取混合物過(guò)濾柱中(將膠一起吸入,溶液過(guò)多時(shí)可分次加入) 。13,000rpm 離心1分鐘。將收集管中的濾出液轉(zhuǎn)入新離心管中。
3. 取六倍體積溶液 B 加入原離心管中(每 100mg 膠加入 600ul) ,清洗管壁后加入過(guò)濾柱中(溶液過(guò)多時(shí)可分次加入),顛倒過(guò)濾柱或輕輕吹打幾次混勻,13,000rpm 離心 1 分鐘。將所有收集的濾出液混合。
4.將總濾出液混勻后加入吸附柱中(溶液過(guò)多時(shí)可分次加入) ,13,000rpm 離心 30-60 秒,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放入收集管中。
5.向吸附柱中加入 600μl 漂洗液(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇) ,13,000rpm 離心 30-60 秒,倒掉廢液,將吸附柱重新放入收集管中。
6.向吸附柱中加入 600μl 漂洗液,13,000rpm 離心 30-60 秒,倒掉廢液。
7.將離心吸附柱放回收集管中,13,000rpm 離心 2 分鐘,盡量除去漂洗液。將吸附柱開(kāi)蓋置于室溫 1-2 分鐘,*晾干,以防止殘留的漂洗液影響下一步的實(shí)驗(yàn)。
8.將吸附柱放到一個(gè)干凈離心管中,向吸附膜中間位置懸空滴加適量 65–70℃預(yù)熱的洗脫緩沖液 20-30μl,室溫放置 2 分鐘。13,000rpm 離心 2 分鐘收集 DNA 溶液。注意:①為了增加回收效率,可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中13,000rpm 再次離心 1 分鐘。②洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于 20μl,體積過(guò)小影響回收效率。③洗脫液的 pH 值對(duì)于洗脫效率有很影響。若用水做洗脫液應(yīng)保證其 pH 值在 7.0-8.5 之間。
9.DNA 回收產(chǎn)物直接后續(xù)實(shí)驗(yàn)或者-20℃保存。
注意事項(xiàng):
1、電泳時(shí)好使用新的電泳緩沖液, 以免影響電泳和回收效果,如下一步實(shí)驗(yàn)要求較高,則應(yīng)盡量使用TAE電泳緩沖液。
2、切膠時(shí),紫外照射時(shí)間應(yīng)盡量短,以免對(duì)DNA造成損傷。
3、回收<100bp及>10kb的DNA片段時(shí), 應(yīng)加大溶膠液的體積,延長(zhǎng)吸附和洗脫的時(shí)間。
4、回收率與初始DNA量和洗脫體積有關(guān),初始量越少、洗 脫體積越小,回收率越低。
5 、如非指明,所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。
聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒訂購(gòu)說(shuō)明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后,將底單等連同收貨人的地址、姓名、等以短信、等形式通知我們。
運(yùn)輸說(shuō)明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái),再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái),再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。
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